Phalloidin-AMCA Conjugate 鬼筆環肽-AMCA
| 貨號 | LX4510 | 售價（元） | 1857 |
| 規格 | 300T | CAS號 |
- 產品簡介
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產品信息
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貨號 |
名稱 |
規格 |
價格/元 |
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LX4510 |
Phalloidin-AMCA Conjugate 鬼筆環肽-AMCA |
300T |
1857 |
產品簡介
鬼筆環肽是一種從鬼筆鵝膏中得到的有毒的環狀七肽，可以與纖維肌動蛋白絲非常特異的結合，并且具有很高的親和力。它能使肌動蛋白聚合物的臨界濃度降低到小于1μg/mL，因此，常作為一種聚合促進劑使用。該物質可以被綠色熒光染料標記，從而作為標記物用于組織細胞培養、組織切片或無細胞系中的肌動蛋白標記。
注意事項：
鬼筆環肽的分子量小，很容易通過細胞，不需要對細胞進行冷丙酮和TRITON X-100處理。毒性較大，戴上手套操作。
鬼筆環肽（Phalloidin）的結合阻止絲狀肌動蛋白（微絲）的解離，穩定微絲結構，從而破壞微絲的聚合-去聚合的動態平衡。此特性使得肌動蛋白聚合發生的臨界濃度（CC）降至＜1μg/mL，因此，可用作一種聚合促進劑。此外，鬼筆環肽還可抑制F-actin的ATP水解活性。
本品為鬼筆環肽-AMCA偶聯物產品的光譜學相關參數為Ex=353/ Em=442；其對應分子量大小為1003.88。選擇性地結合F-肌動蛋白。以納摩爾濃度使用，鬼筆環肽衍生物是方便的探針，用于標記，鑒定和定量甲醛固定和透化組織切片中的F-肌動蛋白，細胞培養物或無細胞實驗。肌動蛋白是一種球狀的，大約42kDa的蛋白質，幾乎存在于所有真核細胞中。 它也是最高度保守的蛋白質之一，與藻類和人類不同的物種相差不超過20％。 肌動蛋白是細胞中兩種細絲的單體亞基：微絲，細胞骨架的三個主要組分之一，以及微絲，是肌細胞中收縮裝置的一部分。 因此，肌動蛋白參與許多重要的細胞過程，包括肌肉收縮，細胞運動，細胞分裂和胞質分裂，囊泡和細胞器運動，細胞信號傳導，以及細胞連接和細胞形狀的建立和維持。
本品以1000×儲存液形式（溶于DMSO）提供。按照100μl/孔（96孔板），總共可做300T。
操作步驟
1. 制備 1× AMCA 鬼筆環肽工作液：
在含有 1% BSA 的 1 mL PBS 中加入 1 μL 1000×AMCA Phalloidin DMSO 溶液。
注意：1. 不同的細胞類型可能染色不同。AMCA鬼筆環肽工作溶液的濃度應相應地制備。
2. 1% 牛血清白蛋白 (BSA) 用于減少非特異性背景染色。
2. 染色細胞：
2.1 用 PBS 清洗細胞 2-3 次。在室溫下將細胞固定在 3.7% 不含甲醇的 PBS 甲醛溶液中 10-30 分鐘。
注意：避免使用任何含有甲醇的固定劑，因為甲醇會在固定過程中破壞肌動蛋白。優選的固定劑是不含甲醇的甲醛。
2.2 固定細胞用 PBS 清洗 2-3 次。
2.3 可選：將 PBS 中的 0.1% Triton X-100 添加到固定細胞中 3-5 分鐘以增加滲透性。用 PBS 清洗細胞 2-3 次。
2.4 固定好的細胞中加入100 μL/孔（96孔板）AMCA鬼筆環肽工作液，室溫染色20-90分鐘。
2.5 用 PBS 輕輕沖洗細胞 2-3 次以去除多余的 AMCA 鬼筆環肽。
注意事項
1）DMSO有毒，使用時請小心操作。
2）了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
Note: 鬼筆環肽具有毒性，需小心操作（對人，其半數致死劑量為2mg/Kg）。
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